Amplificación de ácidos nucleicos.

Un método para amplificar una plantilla de ácido nucleico bicatenario,

que comprende,

(A) preparar una mezcla de reacción que comprende:

(i) un ácido nucleico bicatenario que comprende al menos una copia de la plantilla de ácido nucleico bicatenario, en donde el ácido nucleico bicatenario comprende una primera hebra y una segunda hebra,

(ii) una ligasa de ácido nucleico aislada,

(iii) un primer cebador, en donde el primer cebador es complementario a la primera hebra de la plantilla de ácido nucleico bicatenario,

(iv) un segundo cebador, en donde el segundo cebador es complementario a la segunda hebra de la plantilla de ácido nucleico bicatenario,

en donde la plantilla de ácido nucleico de la mezcla de reacción se calienta a una temperatura elevada por encima de 70 °C;

(B) incubar la mezcla de reacción con una polimerasa de ácido nucleico que tiene actividad de desplazamiento de hebra a una temperatura isotérmica de menos de 70 °C durante al menos 5 min, en donde

se generan numerosos concatémeros que comprenden al menos dos copias de la plantilla de ácido nucleico bicatenario, y la plantilla de ácido nucleico bicatenario se amplifica al menos 100 veces en menos de 60 min desde el inicio del método,

en donde la polimerasa de ácido nucleico comprende una ADN polimerasa.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/030036.

Solicitante: Theranos IP Company, LLC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 7333 Gateway Boulevard Newark, CA 94560 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: PATEL,PRANAV, BELHOCINE,KAMILA, LEE,JOSEPHINE, RICHARDSON,AARON, TABAKMAN,SCOTT.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/6844 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Reacciones de amplificación de ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2729637_T3.pdf

 

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